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实施例10 利用基因改变的细胞系来分析蛋白酶体抑制剂对衣原体蛋白周转时间的影响。本发明还提供了市售的小鼠胚胎细胞系MEC-PA28细胞系PW8875的用途。 RB 36 hpi 是从细菌肺炎衣原体VR1310 蛋白(线性pH 4-7 固定干纸条)凝胶图像上的相应区域获得的,在感染后34-36 小时标记后立即纯化为RB,在感染后36 小时-感染。
咨询回复文件提交截止时间变更为:2022年8月16日09:00(北京时间) g 应用类型抗鸡IgY sdAb-N0705-250ug产品的具体应用类型请参见提供产品的英文说明书。实施例19 点号DT4和DT48(CT858)和CP63(CPN1016) CT858具有可切割的N-末端前导序列并且预测为67kDa周质蛋白,但是在CT858检测到的凝胶上的两个不同位置处。
根据Melanie II 软件的估计,每块凝胶上总共可以显示大约600 个蛋白质点。然后使用基本上用于沙眼衣原体(Schacter 和Wyrick,1994)[22.] 和肺炎的密度梯度超速离心的两个连续步骤收集和纯化标记的EB。衣原体(Knudsen et al. 1999 [17.]) 密度梯度超速离心法。
图2A 显示了源自全细胞裂解物的肺炎衣原体VR1310 蛋白的凝胶图像示例,该蛋白在感染后(h.p.i.) 55-57 小时以及标记后迅速进行[35S] 标记。通过2D-PAGE 回收并分离。因此,如果筛选随机肽,则需要合成和测试大约10,000 个肽,才能生成少至100 个结合肽。
Reticulata (RB) 通过超速离心纯化,并通过电子显微镜表征为直径约1000 nm 的衣原体细菌集合,具有标准细菌细胞核。根据所采用的固定pH 梯度,出于制备目的,通常在凝胶上上样量大于500 g。从基因组序列可知,衣原体具有与分泌机制相关的基因,其中包括几个与其他生物体来源的III型分泌基因同源的基因(Stephens et al. 1998[4.]和Kalman et al. 1999[ 5.])。
图2A是感染后55-57小时标记的肺炎衣原体蛋白的3-10 IPG 2D-凝胶(使用含有硫脲的裂解缓冲液)的放射自显影图的示例。河南大学淮河医院中药饮片供应商遴选项目变更公告(招标编号:HNZB[2022]N0705)
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